甲氨蝶呤(MTX)的释放度分析论文范本
1 器材
Zeta Sizer 3000HS型激光粒度分析仪（英国Malvern公司）；SPA-400原子力显微镜（日本精工公司）；vc 130 探头式超声处理机（美国Sonics&Materials公司）；UV-1600紫外-可见分光光度计（北京瑞利）。聚乙交酯丙交酯（PLGA，成都航利生物材料研究所）；聚乙烯醇（湘中精细化学品厂）。甲氨蝶呤（MTX，浙江万马药业公司）。
2 方法
2.1 纳米颗粒的制备与表征参照文献方法［3］，加以改进，称取MTX 5 mg和50 mg PLGA［L:G=50:50，L:G为共聚物PLGA中乳酸（Lactide）和乙醇酸（Glycolide）单体的质量比］溶于2 ml二氯甲烷，滴加入8 ml质量百分比为2.5%聚乙烯醇水溶液中，在冰浴下用探针式的超声波超声10 min。减压除去二氯甲烷，3 000 r/min离心分离，所得的沉淀用超纯水洗涤3次，制得包载MTX的PLGA纳米颗粒。取少许颗粒加水混匀稀释，取样滴于云母片上，自然干燥后，利用原子力显微镜表征纳米颗粒形貌。载药的纳米颗粒的平均粒径、粒度分布以及Zeta电位通过Malvren Zetasizer 3000HS分析仪测定。
2.2 纳米颗粒的体外释放冻干包载MTX的PLGA纳米颗粒，精确称取冻干粉末10 mg，溶于3 ml氯仿中，然后加入7 ml甲醇，沉淀聚合物，10 000 r/min离心10 min，以分光光度法测得上清液中MTX的含量。精密称取10 mg冻干纳米颗粒置于透析袋中，加入PBS缓冲溶液（pH=7.4）5 ml，将透析袋置于50 ml PBS缓冲溶液中，保持温度37℃，每隔一定时间取1 ml（同时补充等量同温介质），用分光光度法测定各时间点的MTX的含量，计算药物的释放率，绘制释药曲线。
3 结果
3.1 纳米颗粒的特性表征本研究制备的包载MTX的PLGA纳米颗粒为浅棕色的物质，Zeta电位为-18.7 mV，纳米颗粒的原子力图见图1（a），制备出来的纳米颗粒都为较完整的球形，分散性好，颗粒粒径较均匀。粒径分布如图1（b）所示，颗粒的平均粒径为175.9 nm，粒径分布范围为18～225 nm，其中小于51 nm占99%，颗粒大小基本上与原子力图吻合。
3.2 体外药物释放曲线包载MTX的PLGA纳米颗粒的体外释放如图2所示，该纳米颗粒的体外释放存在两相，前4h处于快速释放期，释放的MTX累积量达到加入总量的.42.9%，在该阶段，存在于颗粒表面的药物较快地释放出来；此后进入缓慢释放期，随后的68h释放量相当于药物总量的36.9%，存在于颗粒中的药物逐渐释放出来。
3.3 模型拟合R2为决定系数，是判断回归方程拟合度的重要指标。R2越趋向于1，拟合的效果越好［4，5］。由表2可见，包载MTX的PLGA纳米颗粒的释药过程采用双相动力学方程拟合得到的R2为0.995 7，最接近1。说明整个释药过程分为两相，前期为快速释放相，后期为缓慢释放相，此释药特点符合缓释原理。
甲氨蝶呤（MTX）是一种抗代谢类抗肿瘤药物，对乳腺癌、急 性白血病、骨肉瘤等都具有显着的疗效，但其有引起骨髓抑制细胞下降，肝肾功能损伤等毒副作用，甚至危及患者生命［1,2］。为降低MTX的毒副作用，提高药物疗效，本研究以生物可降解材料聚乙交酯丙交酯（PLGA）为材料，制备了包载MTX的PLGA纳米颗粒，考察其在PBS缓冲溶液的释放行为，并采用多种数学模型拟合体外实验数据，确定最佳的拟合模型。
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